安息香属（Styrax）是安息香科中分布最广，种类最多的一个属，全世界约有130余种，主要分布于亚洲及美洲的热带、亚热带地区，欧洲地中海沿岸仅有1种分布^[1]。目前，我国记录31种^[1]，长江流域以南各省区是我国安息香属植物的分布中心^{[2, 3]}。安息香属植物在药用^{[4, 5]}、观赏^{[6, 7]}和材用^[8]等方面均具有较高的经济价值。

由于安息香属植物的种类繁多，分布范围广泛，形态特征丰富且变异幅度大，该属自林奈建立以来^[9]，其系统发育问题备受国内外学者关注^{[1, 2, 10-15]}。1907年，Perkins^[10]将世界安息香属植物划分为3个组：安息香组（sect. Styrax）、（sect. Foveolaria）和（sect. Eustyrax）；其次，根据裂片的排列方式进一步将安息香组分为两个系：覆瓦状花冠系（ser. Imbricatae）和镊合状花冠系（ser. Valvatae）。黄淑美在《中国植物志》和Flora of China中均沿用了Perkins的处理，将中国安息香属植物分为覆瓦状花冠和镊合状花冠两大类^{[1, 2]}。得益于分子测序技术的成熟，Fritsch^{[11, 12]}和Fritsch等^[13]基于形态学、分子系统学和生物地理学等领域研究，重建了该属的分类系统，将安息香属划分为安息香组（约33种）和将镊合状花冠组（sect. Valvatae）（约97种），划分界限大致对应于暖温带及亚热带区域的地理分布；其次，又进一步将安息香组分为腋生花序系（ser. Styrax）（3种，分布于北美洲西部及地中海地区）和顶生花序系（ser. Cyrta）（约30种，分布于北美洲南部及亚洲东部和东南部），将镊合状花冠组分为镊合状花冠系（约80种，分布于北美洲南部和南美洲）和常绿系（ser. Benzoin）（约17种，仅分布于亚洲东部），其中我国安息香属植物为顶生花序系和常绿系。2018年，Li和Fritsch^[14]对亚洲安息香属顶生花序系植物进行修订，涉及我国5个种，他们仅凭借花序轴是否被毛和种子是否具瘤状凸起的特征，恢复了红叶野茉莉（Styrax rubifolius Guillaumin）的种级地位，与黄淑美在《中国植物志》和Flora of China中把该种作为垂珠花（S. fortunei Hance）异名这一处理相冲突^{[1, 2]}。可见，前人对于我国安息香属植物的分类修订主要局限于形态特征，相似种如：赛山梅（S. confusus Hemsl.）和垂珠花，野茉莉（S. japonicus Siebold & Zucc.）和婺源安息香（S. wuyuanensis S. M. Hwang）等的鉴定仍然存在困难。

同植物的茎、叶等器官的表型特征相比，花粉形态特征具有较强的遗传保守性，是研究植物分类和系统演化的重要依据之一^[16]，在植物分类方面具有重要的参考价值^[17-19]。迄今为止，涉及我国安息香属植物的孢粉学研究较少，仅梁元徽和喻诚鸿^[20]对安息香科15属93种植物（涉及23种中国安息香属植物）的花粉进行光学显微镜和扫描电镜观察，认为安息香属的花粉形态特征变异大，可以将安息香科大部分属的变异幅度都包括在内。该研究对我国安息香属孢粉学研究起到了开拓性作用，但也存在一些不足，如花粉图片拍摄模糊；每个种都缺少极面观或赤道面观图片；大多数种仅有文字描述，缺乏图片证据，只有9种安息香属植物花粉给出了扫描电镜照片。此外，近年经过后续学者的处理，部分种的分类地位发生了变化^{[14, 15]}，并且陆续发布了一些新种和新记录种^[21-25]，已有的安息香属孢粉学研究内容不能反映和代表我国安息香属植物现有种类的分类和系统学关系，因此亟需展开深入研究。

本研究利用扫描电镜对中国安息香属22种植物的花粉进行观察，补充了滇南安息香（S. benzoides Craib）、红叶野茉莉、裂叶安息香（S. supaii Chun et F. hun）、婺源安息香、浙江安息香（S. zhejiangensis S. M. Hwang & L. L. Yu）、中缅安息香（S. buchananii W. W. Sm.）和皱果安息香（S. rhytidocarpus W. Yang & X. L. Yu ）7个种的花粉形态资料，进一步完善了安息香属孢粉学研究内容，以期为我国安息香属的系统发育和分类修订提供更多证据。

1.   材料与方法

1.1   实验材料

本研究花粉材料大部分采自野外活体植株，花粉干燥保存，少部分取自花期蜡叶标本，共22种（表1）。凭证标本保存于江西农业大学标本馆（JXAU），凭证材料保存于江西省竹子种质资源与利用重点实验室。

表  1  材料来源

Table  1.  Source of materials

种名 Species	采集地 Locality	凭证标本 Voucher
银叶安息香 Styrax argentifolius H. L. Li	云南省屏边县大围山	R. Zhang et al. zrr 34(JXAU)
中缅安息香 S. buchananii W. W. Sm.	云南省盈江县	R. Zhang et al. zrr 32(JXAU)
中华安息香 S. chinensis Hu & S. Y. Liang	江西省崇义县	Y. Q. Ruan et al. RL23(JXAU)
赛山梅 S. confusus Hemsl.	湖南省郴州市莽山	Y. Q. Ruan et al. RL41(JXAU)
白花龙 S. faberi Perk.	江西省南昌市梅岭	Y. Q. Ruan et al. RL38(JXAU)
垂珠花 S. fortunei Hance	江西省新建县	Y. Q. Ruan et al. RL44(JXAU)
大果安息香 S. macrocarpus W. C. Cheng	湖南省郴州市莽山	Y. Q. Ruan et al. RL33(JXAU)
裂叶安息香 S. supaii Chun & F. Chun	湖南省郴州市莽山	Y. Q. Ruan et al. RL35(JXAU)
大花野茉莉 S. grandiflorus Griff.	云南省盘龙区	R. Zhang et al. zrr 29(JXAU)
大花野茉莉 S. grandiflorus Griff.	云南省盈江县	R. Zhang et al. zrr 31(JXAU)
老鸹铃 S. hemsleyanus Diels	四川省峨眉山	R. Zhang et al. zrr 43(JXAU)
虎克安息香 S. hookeri C. B. Clarke	云南省盘龙区	R. Zhang et al. zrr 28(JXAU)
滇南安息香 S. benzoides Craib	云南省景洪市	R. Zhang et al. zrr 38(JXAU)
皱叶安息香 S. rugosus Kurz	云南省勐海县	R. Zhang et al. zrr 37(JXAU)
野茉莉 S. japonicus Siebold & Zucc.	山东省崂山	R. Zhang et al. zrr 40(JXAU)
玉铃花 S. obassia Siebold & Zucc.	山东省崂山	R. Zhang et al. zrr 41(JXAU)
皱果安息香 S. rhytidocarpus W. Yang & X. L. YU	广东省乳源县	W.Y. Zhao et al. zwy-1905(JXAU)
红叶野茉莉 S. rubifolius Guillaumin	云南省水富市成凤山	R. Zhang et al. zrr 36(JXAU)
齿叶安息香 S. serrulatus Roxb.	云南省腾冲市	R. Zhang et al. zrr 33(JXAU)
栓叶安息香 S. suberifolius Hook. & Arn.	江西省新建县	Y. Q. Ruan et al. RL49(JXAU)
小叶安息香 S. wilsonii Rehder	四川省宝兴县	R. Zhang et al. zrr 42(JXAU)
婺源安息香 S. wuyuanensis S. M. Hwang	江西省婺源县	Y. Q. Ruan et al. RL26(JXAU)
浙江安息香 S. zhejiangensis S. M. Hwang & L. L. Yu	浙江省建德市	Y. Q. Ruan et al. RL29(JXAU)

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1.2   实验方法

1.2.1   扫描电子显微镜观察

用镊子将干燥过的花粉均匀撒开在导电橡胶样品平台上，置于速普ISC150离子溅射仪中喷金镀膜，取出样品后在NNS450（NovaNanoSEM450）扫描电镜下观察拍照。每份样品选取15~20粒花粉，利用Image J 1.8软件分别测量花粉粒的极轴长（P）、赤道轴长（E）和萌发沟长（G）等花粉形态指标，并记录最大值、最小值及平均值。其中体积系数（$\sqrt{\mathrm{P}\times \mathrm{E}}$）表示花粉粒的大小，P/E 值表示花粉粒的形状（P/E>2，花粉粒为超长球形；1.33<P/E≤2，为长球形）。花粉形态术语参考《孢粉学概论》^[16]和《孢粉学手册》^[26]。

1.2.2   系统聚类分析

系统聚类分析使用IBM SPSS Statistics 26软件，选择7个指标参与聚类分析，其中包括5个定量指标：极轴长、赤道轴长、萌发沟长、极轴/赤道轴（P/E）和体积指数（$\sqrt{\mathrm{P}\times \mathrm{E}}$ ）；2个定性指标：花粉形状和外壁纹饰类型，定性指标编号为1，2，3，···，n^[27]。使用系统聚类组间联接的分析方法，根据平方欧氏距离测量，获得22种安息香属植物的花粉形态聚类分析图。

2.   结果与分析

2.1   花粉形状和大小

《孢粉学手册》^[26]中对花粉大小的分类标准为：花粉极轴长度 10~25 μm 属于小粒花粉，25~50 μm 属于中粒花粉，50~100 μm 属于大粒花粉。由表2 可知，23份供试花粉大部分属于中粒花粉，仅大花野茉莉（S. grandiflorus Griff.）、白花龙（S. faberi Perk.）、垂珠花和赛山梅属于大粒花粉；极轴长度介于36.28~55.56 μm，赤道轴长度介于16.67~36.72 μm，花粉体积指数介于24.59~45.17。体积指数大于40的只有白花龙和大花野茉莉，其中不同居群的大花野茉莉相差不大；体积指数小于30的只有玉铃花（S. obassia Siebold & Zucc.）和中缅安息香，其中玉铃花体积指数最小。

表  2  安息香属植物的花粉形态特征

Table  2.  Pollen morphological characteristics in Styrax

种名 Species	极轴长（P） Polar axis / μm	赤道轴长（E） Equatorial axis / μm	极轴长/赤道轴长（P/E） Polar axis / Equatorial axis	体积指数 （$\sqrt{\mathrm{P}\times \mathrm{E}}$） Volume index	极面观形状 Polar view shape	赤道面观形状 Equatorial view shape	萌发沟长（G） Germinal furrow length / μm	外壁纹饰 Exine ornamentation	聚类分析结果 Cluster analysis result	图版 Plate
滇南安息香 S. benzoides Craib	46.31 （44.13~48.53）	31.02 （28.65~33.23）	1.49	37.90	三角形	椭圆形	38.27 （34.98~37）	网状纹饰	Ⅲ	Ⅰ：A1~A4
皱叶安息香 S. rugosus Kurz	46.98 （45.28~48.09）	26.13 （24.30~28.32）	1.80	35.04	三角圆形	椭圆形	39.38 （38.22~41.81）	疣状纹饰	Ⅳ	Ⅰ：B1~B4
白花龙 S. faberi Perk.	52.65 （49.80~54.83）	32.23 （31.09~32.83）	1.63	41.19	三角形	椭圆形	45.21 （43.72~47.28）	网状纹饰	Ⅰ	Ⅰ：C1~C4
齿叶安息香 S. serrulatus Roxb.	37.44 （34.51~39.69）	24.52 （21.39~27.09）	1.53	30.30	三角圆形	椭圆形	32.25 （30.32~34.15）	脑纹状纹饰	Ⅱ	Ⅰ：D1~D4
垂珠花 S. fortunei Hance	52.56 （48.78~54.64）	32.42 （31.33~33.97）	1.62	41.28	三角圆形	椭圆形	46.87 （45.68~49.08）	网状纹饰	Ⅰ	Ⅰ：E1~E4
大果安息香 S. macrocarpus W. C. Cheng	41.38 （40.77~42.18）	25.27 （23.47~26.13）	1.64	32.34	三角形	椭圆形	34.39 （33.54~35.73）	疣状纹饰	Ⅳ	Ⅰ：F1~F4
大花野茉莉（zrr29） S. grandiflorus Griff.	54.55 （52.45~56.24）	35.51 （32.28-37.84）	1.54	44.01	三角圆形	菱形	45.92 （44.18~47.81）	疣状纹饰	Ⅰ	Ⅰ：G1~G4
大花野茉莉（zrr31） S. grandiflorus Griff.	55.56 （52.63~57.87）	36.72 （33.08~38.17）	1.51	45.17	三角圆形	椭圆形	46.58 （43.97~48.29）	脑纹状纹饰	Ⅰ	Ⅰ：H1~H4
红叶野茉莉 S. rubifolius Guillaumin	41.88 （40.75~44.21）	24.35 （23.74~25.58）	1.72	31.93	三角圆形	椭圆形	36.28 （35.11~37.57）	疣状纹饰	Ⅳ	Ⅱ：A1~A4
虎克安息香 S. hookeri C. B. Clarke	44.23 （42.68~45.96）	25.24 （24.12~25.85）	1.75	33.41	三角圆形	椭圆形	39.53 （38.54~40.23）	网状纹饰	Ⅳ	Ⅱ：B1~B4
老鸹铃 S. hemsleyanus Diels	39.43 （37.15~43.08）	24.91 （23.57~25.97）	1.58	31.34	三角圆形	菱形	34.57 （31.42~37.50）	脑纹状纹饰	Ⅱ	Ⅱ：C1~C4
裂叶安息香 S. supaii Chun & F. Chun	43.42 （42.15~45.48）	26.40 （25.21~27.26）	1.64	33.86	三角圆形	椭圆形	36.24 （35.26~37.05）	脑纹状纹饰	Ⅱ	Ⅱ：D1~D4
赛山梅 S. confusus Hemsl.	53.79 （52.68~55.46）	31.87 （30.57~32.97）	1.69	41.40	三角圆形	椭圆形	46.26 （44.68~47.58）	脑纹状纹饰	Ⅰ	Ⅱ：E1~E4
栓叶安息香 S. suberifolius Hook. & Arn.	43.25 （42.58~44.51）	27.47 （26.95~28.57）	1.57	34.47	三角圆形	椭圆形	35.26 （34.47~36.89）	网状纹饰	Ⅳ	Ⅱ：F1~F4
婺源安息香 S. wuyuanensis S. M. Hwang	46.27 （45.58~47.25）	27.64 （25.82~29.37）	1.67	35.76	三角圆形	椭圆形	38.57 （37.68~40.82）	网状纹饰	Ⅳ	Ⅱ：G1~G4
小叶安息香 S. wilsonii Rehder	43.65 （40.91~46.84）	27.55 （25.94~30.52）	1.59	34.68	三角圆形	椭圆形	37.54 （34.17~39.58）	穴状纹饰	Ⅱ	Ⅱ：H1~H4
野茉莉 S. japonicus Siebold & Zucc.	43.66 （42.37~45.42）	28.54 （26.83~30.66）	1.53	35.30	三角圆形	椭圆形	34.98 （33.28~36.73）	脑纹状纹饰	Ⅱ	Ⅲ：A1~A4
银叶安息香 S. argentifolius H. L. Li	42.84 （41.57~44.55）	28.45 （26.58~30.76）	1.51	34.91	三角形	菱形	36.24 （34.26~38.65）	穴状纹饰	Ⅱ	Ⅲ：B1~B4
玉铃花 S. obassia Siebold & Zucc.	36.28 （34.52~37.84）	16.67 （15.27~18.34）	2.18	24.59	三角圆形	椭圆形	26.82 （24.58~29.43）	网状纹饰	Ⅴ	Ⅲ：C1~C4
浙江安息香S. zhejiangensis S. M. Hwang & L. L. Yu	45.27 （45.65~47.89）	32.22 （31.75~33.58）	1.41	38.19	三角圆形	椭圆形	37.18 （35.28~38.20）	脑纹状纹饰	Ⅲ	Ⅲ：D1~D4
中华安息香S. chinensis Hu & S. Y. Liang	46.89 （44.16~48.67）	28.32 （27.69~29.82）	1.65	36.44	三角圆形	椭圆形	37.26 （35.51~39.28）	网状纹饰	Ⅳ	Ⅲ：E1~E4
中缅安息香 S. buchananii W. W. Sm.	39.15 （37.68~40.34）	19.14 （17.91~20.27）	2.05	27.37	三角圆形	椭圆形	30.27 （29.37~32.84）	疣状纹饰	Ⅴ	Ⅲ：F1~F4
皱果安息香S. rhytidocarpus W. Yang & X. L. YU	47.81 （44.28~50.06）	32.71 （31.09~34.68）	1.46	39.55	三角形	椭圆形	41.62 （38.08~43.87）	网状纹饰	Ⅲ	Ⅲ：G1~G4

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花粉的形状由P/E值的大小来表示，当1.33<P/E≤2为长球形，P/E>2为超长球形^[26]。由表2可知，22种安息香属植物的花粉极轴长和赤道轴长比值 P/E 介于 1.41~2.18，分为长球形和超长球形。超长球形花粉见于玉铃花（P/E=2.18）和中缅安息香（P/E=2.05）。长球形花粉见于20种，P/E值介于1.41~1.80，其中皱叶安息香（S. rugosus Kurz）花粉P/E值最大，为1.75，浙江安息香P/E值最小，为1.41。供试安息香属植物均为单粒花粉，极面观形状多数为三角圆形，少数为三角形；赤道面观形状多数为椭圆形，少数为菱形（图版Ⅰ~图版Ⅲ）。

  图版Ⅰ  安息香属花粉形态扫描电镜图。

A：滇南安息香；B：皱叶安息香；C：白花龙；D：齿叶安息香；E：垂珠花；F：大果安息香；G：大花野茉莉（zrr29）；H：大花野茉莉（zrr31）。1：极面观；2、3：赤道面观；4：外壁纹饰。

  图版Ⅰ.  Scanning electron micrographs (SEM) of pollen morphology of Styrax.

A: S. benzoides; B: S. rugosus; C: S. faberi; D: S. serrulatus; E: S. fortunei; F: S. macrocarpus; G: S. grandifloras (zrr29); H: S. grandifloras (zrr31). 1: Polar view; 2, 3: Equatorial view; 4: Exine ornamentation.

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  图版Ⅲ  安息香属花粉形态扫描电镜图。

A：野茉莉；B：银叶安息香；C：玉铃花；D：浙江安息香；E：中华安息香；F：中缅安息香；G：皱果安息香。1：极面观；2、3：赤道面观；4：外壁纹饰。

  图版Ⅲ.  Scanning electron micrographs (SEM) of pollen morphology of Styrax.

A: S. japonicus; B: S. argentifolius; C: S. obassia; D: S. zhejiangensis; E: S. chinensis; F: S. buchananii; G: S. rhytidocarpus. 1: Polar view; 2, 3: Equatorial view; 4: Exine ornamentation.

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2.2   花粉萌发沟

本研究发现（图版Ⅰ~图版Ⅲ），所有供试花粉均具3条环状萌发沟，且不在极区汇合形成复合沟。此外，根据花粉萌发沟的赤道轴处凸起情况，可将22种安息香属植物的花粉分为3类，即具明显球状凸起；球状凸起较小；无球状凸起。其中萌发沟的赤道轴处呈现明显球状凸起的有垂珠花、裂叶安息香和中华安息香（S. chinensis Hu & S. Y. Liang）3种；无球状凸起的有齿叶安息香、大果安息香（S. macrocarpus W. C. Cheng）、老鸹铃（S. hemsleyanus Diels）、赛山梅、银叶安息香（S. argentifolius H. L. Li）、野茉莉和婺源安息香7种；剩下12种植物花粉的萌发沟赤道轴处均有较小的球状凸起。所有供试花粉的萌发沟长度介于26.82~46.87 μm，种间差异较明显。其中萌发沟最短的为玉铃花，且只有玉铃花的萌发沟长度小于30 μm；萌发沟最长的为垂珠花。此外，白花龙、赛山梅、垂珠花、大花野茉莉和皱果安息香的萌发沟长度均大于40 μm，可见萌发沟长度和花粉粒大小存在一定关联性（表2）。

2.3   花粉外壁纹饰

通过扫描电镜观察发现，23份供试花粉的外壁纹饰可以分为4类（图1），即网状纹饰、疣状纹饰、脑纹状纹饰和穴状纹饰。其中滇南安息香（图版Ⅰ：A4）、白花龙（图版Ⅰ：C4）、垂珠花（图版Ⅰ：E4）、虎克安息香（S. hookeri C. B. Clarke）（图版Ⅱ：B4）、栓叶安息香（S. suberifolius Hook. & Arn.）（图版Ⅱ：F4）、婺源安息香（图版Ⅱ：G4）、中华安息香（图版Ⅲ：E4）、皱果安息香（图版Ⅲ：G4）和玉铃花（图版Ⅲ：C4）9种花粉的外壁纹饰为网状纹饰；皱叶安息香（图版Ⅰ：B4）、大果安息香（图版Ⅰ：F4）、大花野茉莉zrr29（图版Ⅰ：G4）、红叶野茉莉（图版Ⅱ：A4）和中缅安息香（图版Ⅲ：F4）5种花粉的外壁纹饰为疣状纹饰；齿叶安息香（29）（图版Ⅰ：D4）、大花野茉莉zrr31（图版Ⅰ：H4）、老鸹铃（图版Ⅱ：C4）、裂叶安息香（图版Ⅱ：D4）、赛山梅（图版Ⅱ：E4）、野茉莉（图版Ⅲ：A4）和浙江安息香（图版Ⅲ：D4）7种花粉的外壁纹饰为脑纹状纹饰；小叶安息香（S. wilsonii Rehder）（图版Ⅱ：H4）和银叶安息香（图版Ⅲ：B4）2种花粉的外壁纹饰为穴状纹饰。

图  1  安息香属植物花粉外壁纹饰特征

A：疣状纹饰；B：网状纹饰；C：脑纹状纹饰；D：穴状纹饰。

Figure  1.  Morphological characteristics of exine ornamentation of Styrax

A: Verrucate; B: Reticular; C: Cerebelloid; D: Foveolar.

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  图版Ⅱ  安息香属花粉形态扫描电镜图。

A：红叶野茉莉；B：虎克安息香；C：老鸹铃；D：裂叶安息香；E：赛山梅；F：栓叶安息香；G：婺源安息香；H：小叶安息香。1：极面观；2、3：赤道面观；4：外壁纹饰。

  图版Ⅱ.  Scanning electron micrographs (SEM) of pollen morphology of Styrax.

A: S. rubifolius; B: S. hookeri; C: S. hemsleyanus; D: S. supaii; E: S. confusus; F: S. suberifolius; G: S. wuyuanensis; H: S. wilsonii. 1: Polar view; 2, 3: Equatorial view; 4: Exine ornamentation.

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2.4   系统聚类分析

由聚类分析可知（图2），在距离为4.0处，可将22种安息香属植物分为5类。第Ⅰ类包括白花龙、垂珠花、赛山梅和大花野茉莉4种，其花粉为长球形，极轴长度均大于50 μm，萌发沟长度大于45 μm，体积指数均大于40，且花粉外壁纹饰类型最为丰富，有疣状、网状和脑纹状纹饰3种；第Ⅱ类包括齿叶安息香、老鸹铃、小叶安息香、银叶安息香、裂叶安息香、野茉莉6种，其花粉为长球形，P/E值1.50~1.60（除裂叶安息香，P/E值=1.64），且花粉外壁纹饰为脑纹状和穴状纹饰，其中穴状纹饰仅在该类出现；第Ⅲ类包括滇南安息香、浙江安息香和皱果安息香3种，其花粉为长球形，P/E值均介于1.40~1.50，且体积指数相近（37.9~39.55）；第Ⅳ类包括婺源安息香、栓叶安息香、中华安息香、虎克安息香、大果安息香、红叶野茉莉和皱叶安息香7种，其花粉为长球形，极轴长度均介于40~50 μm，赤道轴长度均介于20~30 μm，且花粉外壁纹饰类型较单一，仅有疣状和网状纹饰2种；第Ⅴ类为中缅安息香和玉铃花2种，其花粉为超长球形，极轴长度均介于30~40 μm，赤道轴长度均介于10~20 μm。

图  2  22种安息香属植物花粉性状聚类分析

Figure  2.  Cluster analysis of pollen morphology of 22 species in Styrax

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3.   讨论

由上述结果可知，供试材料均为单粒花粉，具3条环状萌发沟，近两极，但不在极区汇合成复合沟，根据《孢粉学手册》提出的NPC分类系统^[26]，属于N₃P₄C₅型，与梁元徽和喻诚鸿^[20]提出的安息香型花粉型一致。花粉形态特征说明安息香属植物在分类地位上相近，但花粉大小、形状、萌发沟类型和外壁纹饰种类在种间仍存在一定差异，这些花粉特征对中国安息香属植物的鉴定和分类具有积极的参考价值。

3.1   安息香属植物花粉形态特征的分类学意义

研究表明，植物花粉的形态特征是种间鉴定的重要依据，在某些分类关系不确定的类群中具有重要的分类学意义^{[28, 29]}。梁元徽和喻诚鸿^[20]对中国安息香属植物的花粉形态进行光学显微镜与扫描电子显微镜观察，认为安息香属花粉为中型花粉，主要形状为长球形，极面观为三裂圆形至钝三角形，赤道面观为椭圆形或菱形，外壁纹饰为网状纹饰、脑纹状纹饰和穴状纹饰，本研究结果与其基本一致；但本研究还发现玉铃花、中缅安息香的花粉形状为超长球形；白花龙、垂珠花、赛山梅和大花野茉莉的花粉极轴长度超过50 μm，为大型花粉；皱叶安息香、齿叶安息香和大果安息香等6种植物的花粉外壁纹饰为疣状纹饰。此外，本研究提供了更加全面、清晰的花粉形态特征电镜照片，并分析了安息香属植物的花粉萌发沟类型，在前人研究的基础上进一步完善和更新，为本属植物的鉴定和分类提供了重要的理论依据。如相似种赛山梅和垂珠花，这两个种是目前我国安息香属内最难区分的两个种，仅依靠形态特征很难将两者区分^[7]，但垂珠花的花粉萌发沟赤道轴处呈明显球状凸起，而赛山梅萌发沟无球状凸起，基于花粉形态特征能轻易区分二者。野茉莉和婺源安息香都具有属内罕见的菱形叶和较长的果梗、花梗^[1]，二者极易混淆而造成错误鉴定，但是以花粉形态特征为分类依据，野茉莉花粉外壁纹饰为脑纹状纹饰，而后者为网状纹饰，则可顺利鉴别。

3.2   安息香属花粉形态特征反映的种间亲缘关系

花粉形态特征稳定性强，可用于分析植物种间的亲缘关系^[30]。基于22种安息香属植物花粉特征的聚类结果表明：（1）白花龙、垂珠花和赛山梅的花粉均为长球形且体积指数均大于40，是本次供试材料中花粉最大的一个类群，具有较近的亲缘关系，这和传统分类学与分子系统学结果一致：三者均为落叶小乔木或灌木，叶椭圆形，具细齿，叶脉5~7对^{[1, 2, 7]}；基于叶绿体全基因组所构建的系统发育树中，三者聚在同一小支上^[7]。（2）大花野茉莉和野茉莉亲缘关系较远，前者为大型花粉，外壁纹饰具疣状纹饰（图版Ⅰ：G4）和脑纹状纹饰（图版Ⅰ：H4），而后者为中型花粉，外壁纹饰均为脑纹状纹饰，且基于叶绿体全基因组^[7]和ITS序列^[11]构建的系统发育树均显示二者的系统发育关系较远，因此不同意将大花野茉莉作为野茉莉的异名处理^[15]。（3）红叶野茉莉和垂珠花的亲缘关系一直以来饱受争议，《中国植物志》中将红叶野茉莉作为垂珠花的异名^[2]，而Li和Fritsch^[14]则根据二者的花序和种子形态特征存在一定差异，恢复了红叶野茉莉的种级地位。本文聚类结果表明二者的花粉特征差异明显，前者为中型花粉、外壁纹饰为疣状纹饰，而后者为大型花粉、外壁纹饰为网状纹饰。因此，孢粉学证据支持Li和Fritsch^[14]的分类处理，认为二者的亲缘关系较远。（4）浙江安息香和大果安息香亲缘关系较远，前者花粉外壁纹饰为脑纹状纹饰、萌发沟赤道轴处存在球状凸起，而后者为疣状纹饰且萌发沟赤道轴处无球状凸起。因此支持恢复浙江安息香的种级地位的处理^[24]。（5）中缅安息香和玉铃花的花粉为供试材料中唯二的超长球型花粉，且体积指数远小于其他4个类群，具有较近的亲缘关系。但从二者地理分布情况来看，中缅安息香主要分布于缅甸克钦邦地区和我国云南省盈江县地区，而玉铃花是本属植物中分布纬度最高的种，可达日本北海道岛^[3]，且二者在叶片、花序和种子等方面的形态特征差异明显^{[1, 2, 7]}。此外，叶绿体全基因组构建的系统发育树也显示二者的系统发育位置相距较远，这和传统形态学与分子系统学结果均不相符。可见，本文聚类分析结果对我国安息香属植物的分类学研究具有一定价值，但同时也存在与传统分类学和分子生物学研究结果相悖的情况，具有一定的局限性，说明仅依靠花粉形态特征不能圆满解决该属的属下系统关系。

前人研究认为，被子植物花粉大小的进化方式为由大到小^[26]，花粉外壁纹饰进化方式为疣状纹饰-脑纹状纹饰-孔穴状纹饰-网状纹饰-网状雕纹^[31]。根据本研究结果，大花野茉莉花粉最大，外壁纹饰为疣状纹饰和脑纹状纹饰，应为较原始的种，而玉铃花花粉最小，外壁纹饰为网状纹饰，应为较进化的种，这也和基于ITS序列和叶绿体全基因组所构建的系统发育关系基本一致^{[7, 11]}，说明安息香属植物的花粉形态特征和分子系统发育证据之间具有一定相似性。梁文斌等^[32]观察到相似种垂珠花和赛山梅的叶上、下表皮细胞垂周壁式样分别为弓形和浅波状以及浅波状和波状，根据被子植物叶表皮细胞垂周壁式样进化趋势：平直状-弓形-浅波状-深波状^[33]，认为垂珠花较之赛山梅进化水平更高。结合本研究结果，垂珠花的花粉外壁纹饰为网状纹饰，而赛山梅为脑纹状纹饰，花粉特征同样表明垂珠花更为进化，可见安息香属植物的花粉形态特征和叶表皮微形态特征的进化程度较为一致。

综上所述，本研究认为中国安息香属植物的花粉形态特征在种间存在一定差异，可为本属的种间分类及亲缘关系提供重要依据，但植物分类不能仅依靠孢粉学证据，还需结合形态学、解剖学和分子生物学等多方面的研究结果进行相互印证，才能更好地厘清中国安息香属植物的分类关系。